Трансформация - химическа енциклопедия
ТРАНСФОРМАЦИЯ (лат transformatio -. Реализациите) в молекулярната генетика. наследствено промяна в комуникационни-клетки от инфилтрацията на чужда ДНК.
В резултат на преобразуване на реципиентна клетка може да придобива и прехвърляне резистентност черта на тяхното потомство, преди това е липсва, но достъпно от донорни клетки (напр. Антибиотик ген на резистентност).
T ransformatsiya имат повече. бактерии (пневмококи, стрептококи, хемофилия целия бактерии, бактерии) е естествен процес появяващи се при р. популации. В същото клетките. способна да абсорбира и включи в своята хромозома хетероложна ДНК. са в състояние т. наречен. компетентност (готовност), идва в определен период от жизнения цикъл (фаза край на растежа). развитието на компетентност може да отиде от типа "каскада": клетки. се превърне във възможност, изолиран nizkomol среда. протеин (т.е.. е т.нар. фактор компетентност), к-нето, адсорбиран върху други. клетки. също така ги прави компетентен.
Механизмът на преобразуване съдържа необратима адсорбция на ДНК донорни клетки (напр. секретира в средата, в резултат на клетъчен лизис) на превръзка-STI получател клетката. Добър адсорбирания ДНК само. с мол. тегло не по-малко от 300 хиляди души. Повечето бактерии могат да адсорбират ДНК от всякакъв произход. В хемофилни бактерии адсорбира само такива ДНК фрагменти. притежавани до извършване специфичност. последователност от 11 бд. характерен само за ДНК на бактериите. Видове-специфичен. Адсорбция също е характеристика на Neisseria гонорея. Адсорбция се извършва на спец. рецептори. където ДНК се свързва с протеини и специални "прибрано" в клетката. По този начин една от нишките на ДНК се унищожава поради нуклеазна активност на ДНК свързващи протеини. и клетката се доставя вече едноверижна ДНК. Тя веднага обвити протеинови молекули. притежавани до защита на клетъчната ДНК от екзонуклеази и допринасят за неговото контакт с хромозомата. последвано от рекомбинация с него. В този процес на трансформация се прекратява.
ДНК може да бъде въведена в бактерии изкуствено. За тази цел, например. колиформи (за които не е природен трансформация характеристика) се охлажда и се третира с разтвори на СаСЬ 2 или RbCl или подложени на замръзване при ниски т-ма последвано от размразяване. По този начин клетките стават пропускливи за ДНК. обаче механизъм трансформация в този случай е напълно различен от този, описан по-горе.
Бактериите могат да влизат чрез трансформация и ДНК плазмиди. Крайният резултат е появата на клетки. носи чужд плазмид в автономната състояние, или включен в хромозомата. Механизмът на проникване в клетката на плазмидна ДНК е същата като хромозомата. Въпреки това, наличието на едноверижна ДНК, и др. Процеси, свързани с абсорбция, така че "развалят" плазмид. вероятността за правилно възстановяване на пръстеновидния формата възпроизвеждане ниски (мономерни форми на клетъчна трансформация плазмиди не е ефективен). Следователно, използва мултимерен (състоящ се от няколко. Плазмидите) плазмид форма или с директни Повтаря нуклеотиди. Затова шанс да "изгради" пълен плазмид покачване.
Използване на трансформация плазмид може също да се осъществи протопласти (клетки с клетъчна стена дистанционно), притежавани до тогава регенерирани в цялостни клетки. ДНК. прониква в тях, почти не е повреден и остава двойно верижна. Плазмидът трансформация в много отношения, подобен на тон. Наречен. трансфекция. когато бактерии консумират ДНК фаги (бактериален вирус), предварителен подбор на фагови частици. Тази ДНК в кодовете на бактерия за производство на нови фагови частици. притежавани до унищожи бактериалната клетка и след това излизат навън.
Т ransformatsiya дрожди т. Б. извършва само по изкуствен път. За тази цел, протопласти или клетки, третирани със соли на алкални метали. ДНК прониква в дрожди протопласти са под влиянието на електрическо. бита (т. наречен. електропорация).
Т ransformatsiya клетки на бозайник е възможно само в изкуствено чрез микроинжектиране на чужда ДНК в ядрото на ембриони, соматични. клетки или поемане на ДНК от клетки в тъканна култура. В повечето случаи, ДНК се добавя към смес на р-ра CaCl2 и фосфатен буфер; образува фина утайка-Ing адсорбирания и се абсорбира от клетките. Също така е възможно въвеждане на ДНК в липозома или като се използва като вектор ДНК, съдържаща вирус умерена настоящето с включването на ДНК геномни фрагменти животни.
Растителните клетки не са в състояние да абсорбират ДНК. При преобразуването на двусемеделни растителни клетки, използвайки регенериращите протопласти. абсорбира свободна ДНК и ДНК. капсулирани в липозоми. Регенериращ трансформира протопласти форма т. Наречен. калус тъкан. на рояк след това формира растение. И сътр. метод за въвеждане на чужда ДНК в генома на такова увеличение. клетки е естествена инфекция от бактерия Agrobacterium Tume-faciens, носител TI- или Ri-плазмида. Тази бактерия е в състояние да проникне в непокътнат възход. клетки. и след това освободен плазмид интегрирани в генома. В едносемеделни растения, тези плазмиди не работят в клетката. за превръщането им да се прибегне до директен ДНК трансфер в протопласти. използване на електропорация. трансформация на растенията може да се извърши и с помощта на "удар" в клетъчните ускорява частиците на волфрам или злато. при притежавани до предварително депозирани ДНК.
Т ransformatsiyu използва в генетични инженерни техники за въвеждане на гени в клетката. извършване предварително определена информация.
T ransformatsiya първи път е открит през 1928 г. от Ф. Грифит. През 1944, G. Avery и сътрудници показват, че превръщането на някои патогенни за непатогенни бактерии се извършва чрез прехвърляне на първи ДНК геном. освободен от клетките на вирулентни щамове.
Литература Kozhina T. I. Zaharov I. А. "Успехи на съвременната биология", 1987, т. 104, гр. 1 (4), стр. 3-21; Prozorov А. Превръщането на бактерии, М. 1988; Sybenga J. "Теоретично. Appl. Жене.", 1983, кн. 66, № 3-4, стр. 179-201; Kucherlopati Р. А. И. Skoultchi "CRC критичен об. Biochem.", 1984, кн. 16, № 4, стр. 349-79. АА Prozorov.