Определяне на глюкоза - studopediya
Повече от 90% от разтворими въглехидрати ниско молекулно тегло върху кръвната захар, в допълнение, малки количества могат да присъстват фруктоза и пентози, и по патология и галактоза.
Хипергликемия наблюдава в много патологични състояния: диабет, панкреатит, травма на мозъка и сътресение, енцефалит, mukovistsiidoze, умствено стимулиране, отравяне с въглероден окис, живак. В зависимост от тежестта на ниво глюкоза диабет е гладно. под лека - 6.7-7.8 ммол / л.
Хипогликемия е предозиране на инсулин, панкреатични заболявания, злокачествени заболявания, някои инфекциозни и токсично увреждане на черния дроб, gipotirioze, наследствени заболявания, свързани с дефицит на ензими.
Глюкозурия наблюдава при захарен диабет, надбъбречна хиперплазия, бъбречна недостатъчност, сепсис, травма и мозъчни тумори, отравяния морфин, панкреатит, синдром на Fanconi.
Единична натоварване глюкоза причинява при пациенти с диабет бавно увеличаване гликемичен крива на хипогликемичен фаза обикновено не се открива, намалението е много бавен крива. захар урината също определена.
Важно е също за диагностика на диабет за определяне на концентрацията на инсулин и С-пептид. В preinsulina молекула е С-пептид, състоящ се от 31 аминокиселини, свързващи веригите А и Б. В синтеза на инсулин, той отсече пептидаза и с инсулин като попадне в кръвообращението. инсулин не е активен преди пептид разцепване. Това дава възможност на панкреаса да образуват инсулинови запаси. С-пептид и инсулин се освобождават в равни количества, по този начин в С-пептид на инсулиновата секреция може да бъде оценена. Но имайте предвид, че скоростта на елиминиране от движението на тези вещества е различно. С-пептид в кръвта е по-дълго, отколкото е стабилен инсулин и инсулин е 5 пъти. При здрави С-пептид е в диапазона 1-4 нг / мл, инсулин от 6 до 27 MU / мл. Повишаване нивото на С-пептид може да бъде показателно за хипертрофия на В клетки, инсулин-зависим захарен диабет (NIDDM). Намаляването на С-пептид, посочен в инсулин-зависим захарен диабет (IDDM).
Диагнозата на диабет ще се прилага определението на албумин в урината. Дневната урината на здрави хора може да бъде открит до 8 мг протеин. При диабет протеин се увеличава до 20-300 мг / л.
Допълнителен критерий на риска от диабет е да се определи липидния метаболизъм. Нивото на триглицеридите в кръвта варира паралелно повишаване на кръвната захар.
Методи за определяне на глюкоза са разделени в три групи:
· Методи използват цветни реакции, включващи продукти, образувани чрез нагряване на въглехидрати със силни киселини.
Ензимни изследователски методи съчетават висока точност, те се основават на една от двете реакции - или хекспкиназа glyukoooksidaznoy. Когато хекспкиназа глюкозата се фосфорилира първо за сметка на ATP се дължи на действието на хексокиназа; получената глюкозо-6-фосфат естер в присъствието на глюкоза-6-фосфат дехидрогеназа възстановява NADP, чийто размер се определя от увеличението на поглъщане на светлина в ултравиолетовата област.
Лесно осъществим метод глюкоза оксидаза, в която глюкозооксидаза окислява глюкоза от атмосферен кислород, за да се образува водороден пероксид, чийто размер се определя или чрез химически средства или чрез способността му да се окисляват в присъствието на пероксидаза диамини да образуват цветни продукти.
метод Принцип: глюкоза оксидаза, глюкоза окислява до получаване на водороден пероксид, който под действието на пероксидаза окислява ortotolidin да се образува синьо хромоген.
1.Natriya хлорид 9 г / л (0.9 д Наси в 100 мл вода).
2. Цинков сулфат 50 грама / литър: 5 г цинков сулфат се разтваря във вода, обемът се довежда до 100 мл.
3. Натриев хидроксид, 0.3 мол / л: получен чрез разтваряне на 1,2 NaOH в 100 мл вода.
4. Ortotoliidin 1% разтвор: 1 г от лекарството се разтваря в 100 мл абсолютен алкохол.
5. ацетатен буфер рН 4.8: Смесете 4 части 0.25 М оцетна киселина и 6 части 0.25 М натриев ацетат.
7. пероксидаза от хрян.
8. Работно реагент в 80 мл ацетат буфер се разтваря 2 мг глюкозна оксидаза и 1 мг пероксидаза, се прибавя 1 мл 1% разтвор ortotolidina, разбърква се и обемът се довежда с буфер до 100 мл.
9. калибриране глюкозни разтвори. Първо, изходен разтвор с концентрация от 50 ммол / л, към която 180 мг глюкоза се разтварят в 20 мл бензоена киселина. От този разтвор се приготвят разтвори работни калибриране, съдържащ 3 ммол / л; 6 ммол / л; 9 ммол / л; 12 ммол / л; 15 ммол / л; 18 ммол / л; 21 ммол / л, за които като 0.6 мл; 1.2 мл; 1.8 мл; 2.4 мл; 3.6 мл; 4.2 мл от изходния разтвор се регулира с наситен разтвор на бензоена киселина и 10 мл. Тези разтвори съдържат глюкоза при същата концентрация, при която е в кръвта.
определения производството: тръба центрофуга е от 1.1 мл натриев хлорид, 0,4 мл от разтвор на цинков сулфат и 0,4 мл 0,3 N разтвор на NaOH, разбърква; където гелът се образува много тънък цинков оксид хидрат, той освобождава 0.1 мл кръв или калибриране разтвор snava разбърква и след 10 минути. центрофугира при 3000 об / мин за 10 минути.
Към 1 мл от супернатанта се добавя 3 мл работен реагент и се смесват внимателно. След 15 минути оцветяване развива и фотометрични кювети с оптична дължина на пътя 1 cm с червен филтър (625 пМ) при празно които дават едновременно с работните тестове, но вместо на вземане на кръв физиологичен разтвор на натриев хлорид. При получаването на кривата на калибриране за кръвни проби, взети 0.1 мл съответния разтвор за калибриране.
Нормално гладно стойност: 3.5 5.7 ммол / л (60-100 мг в 100 мл).